Análise de Homologias
A homologia de sequências tem sido uma forte evidência a favor da Teoria da Evolução, sugerindo que a similaridade indica ancestralidade comum entre organismos diferentes que possuem estruturas frequentemente semelhantes e com a mesma origem embrionária.
Quando as sequências correspondem entre elas na sua totalidade diz-se que a correspondência é global, contudo podem existir falhas devido à deleção ou inserção de nucleótidos na sequência (Gap Penalties), o que leva à existência de uma menor significância biológica.
As sequências homólogas do gene CR1 foram obtidas através do motor de busca BLAST, que é o principal algoritmo de procura de similaridades de sequências online. Este programa foi o escolhido pois é aquele que produz resutados de maneira mais veloz. Uma vez que a sequência de nucleótidos que constitui o nosso gene é muito extensa, foi usado o MegaBlast (versão do BLAST capaz de analisar sequências de grande dimensão de forma eficiente).
Para a análise da proteína do gene CR1 recorreu-se à funcionalidade Blastp. Posteriormente, elaborou-se uma pesquisa mais avançada, com o intuito de procurar homologias que não pertencessem à classe dos mamíferos. Para isso, no painel de controlo do BLAST, foi clicada na opção Exclude Organism e inserido mammals (taxid:40674).
Para o gene CR1 foram encontrados os seguintes genes homólogos:
- Homo sapiens complement C3b/C4b receptor 1 (Knops blood group);
Human DNA sequence from clone RP11-78B10 on chromosome 1;
Human DNA sequence from clone RP11-57I17 on chromosome 1;
Pongo abelii BAC clone CH276-209M18 from chromosome 1;
Pan troglodytes BAC clone CH251-540O10 from chromosome 1;
Macaca fascicularis complete genome, chromosome chr1 .
Para a proteína parcial SCR25 foram encontradas as seguintes sequências homólogas:
CR1 protein domain SCR25 [Homo sapiens];
Complement component (3b/4b) receptor 1 (Knops blood group) [Homo sapiens];
PREDICTED:Complement receptor type 1 isoform F precursor [Homo sapiens];
PREDICTED: Complement receptor type 1 isoform S precursor [Homo sapiens];
Complement receptor type 1 isoform X4 [Macaca fascicularis];
Complement receptor 1 [Pan troglodytes]
Complement receptor type 1 [Myotis brandtii];
Complement receptor 1 [Oryctolagus cuniculus];
Complement receptor type 1 [Tupaia chinensis];
Complement receptor type 1-like [Equus przewalskii];
Complement receptor type 1-like protein [Sus scrofa domesticus];
Complement receptor [Papio cynocephalus];
Complement receptor type 1 [Dasypus novemcinctus]
PREDICTED: Complement receptor type 1 precursor [Pan troglodytes];
PREDICTED: Complement receptor type 1 [Macaca mulatta];
PREDICTED: Complement receptor type 1 [Gorilla gorilla gorilla];
PREDICTED: Complement receptor type 1 [Pongo abelii];
PREDICTED:Complement receptor type 1 [Rhinopithecus bieti];
PREDICTED: Complement receptor type 1 isoform X4 [Equus caballus];
PREDICTED: Complement receptor type 1-like isoform X4 [Equus asinus];
PREDICTED: complement receptor type 1 [Jaculus jaculus]:
PREDICTED: complement receptor type 1 [Miniopterus natalensis];
PREDICTED: complement receptor type 1 [Otolemur garnettii];
PREDICTED: complement receptor type 1-like [Myotis davidii];
PREDICTED: complement receptor type 1 [Balaenoptera acutorostrata scammoni] .
Para a proteína parcial SCR25 excluindo a classe dos mamíferos foram encontradas as seguintes sequências homólogas:
C4b-binding protein alpha chain [Apaloderma vittatum];
C4b-binding protein alpha chain-like [Alligator mississippiensis];
Complement receptor type 1 [Tinamus guttatus];
C4b-binding protein alpha chain, partial [Balearica regulorum gibbericeps];
Complement component receptor 1-like [Pygoscelis adeliae];
PREDICTED: complement component receptor 1-like protein [Leptosomus discolor];
PREDICTED: complement receptor type 1-like [Chrysemys picta bellii];
PREDICTED: complement component receptor 1-like protein [Alligator sinensis];
PREDICTED: complement component receptor 1-like protein [Pygoscelis adeliae];
PREDICTED: complement component receptor 1-like protein [Tyto alba];
PREDICTED: complement receptor type 2-like [Nipponia nippon];
PREDICTED: C4b-binding protein alpha chain-like [Buceros rhinoceros silvestris].
Relativamente à análise da proteína do gene CR1 sem exclusão de classes, obtiveram-se no blast vários resultados com elevado score sendo que o resultado com score mais elevado obteve uma query cover de 100% e uma identy de 100% e o score menos elevado apresentava uma query cover de 100% e identy de 64%. Conclui-se também que a maior parte das homologias encontradas são mamíferos, mais precisamente primatas.
Quanto à análise da proteína do gene CR1 com exclusão da classe dos mamíferos, notou-se que os resultados apresentavam um score mais baixo do que o anterior, uma vez que foram encontrados resultados com query covers menores que 90% e identy menor que 40%, o que significa que apesar de existir, a similaridade entre as sequências é baixa.
Referências Bibliográficas:
- Material de apoio à UC de Bioinformática, Aula Teórica 2